Cette étude présente le développement et la validation d’une méthodologie HPLC-DAD innovante pour la détection et la quantification de la psilocybine et de la psilocine dans des extraits de champignons psychédéliques destinés à un usage médical.
La méthodologie a été validée selon les directives de la RDC n° 166/2017 de l’Agence nationale brésilienne de surveillance sanitaire (ANVISA). Les résultats montrent une limite de détection de 1,58 mg/L et une limite de quantification de 4,78 mg/L pour la psilocybine, tandis que pour la psilocine, elles étaient respectivement de 1,70 et 5,17 mg/L.
La méthode a démontré une précision satisfaisante avec des intervalles de récupération pour la psilocybine allant de 80 à 120% et pour la psilocine de 98 à 116%. L’analyse précise a révélé des concentrations de psilocybine (2,57%) et de psilocine (0,16%) dans les échantillons.
Développer et valider une méthode HPLC-DAD pour identifier et quantifier la psilocybine et la psilocine extraites des champignons Psilocybe cubensis, dans le but de permettre leur dosage dans des formulations pharmaceutiques pour un usage commercial et clinique appliqué à la thérapie assistée par psychédéliques.
- Utilisation d’un système HPLC-DAD PerkinElmer avec colonne C18 (150,0 mm de longueur × 4,6 mm de diamètre interne × 5 μm de taille de particule)
- Méthode de gradient employant de l’eau ultrapure Milli-Q (phase mobile A) et de l’acétonitrile (phase mobile B), toutes deux acidifiées à 0,3% avec de l’acide formique
- Débit de 0,8 mL/min sur 18 minutes avec un volume d’injection de 15 μL
- Température de colonne maintenue à 30°C et analyse effectuée à une longueur d’onde de 266 nm
- Validation suivant les directives RDC n° 166/2017 d’ANVISA
- Limites de détection (LOD) : 1,58 mg/L pour la psilocybine et 1,70 mg/L pour la psilocine
- Limites de quantification (LOQ) : 4,78 mg/L pour la psilocybine et 5,17 mg/L pour la psilocine
- Récupération : 80-120% pour la psilocybine et 98-116% pour la psilocine
- Courbes de calibration linéaires avec coefficients de corrélation R² > 0,99
- Méthode sélective, précise et robuste aux petites variations des conditions analytiques
- Quantification précise : psilocybine (2,57%) et psilocine (0,16%) dans les extraits de Psilocybe cubensis
- Temps d’analyse réduit à 18 minutes avec des temps de rétention de 3,13 min (psilocybine) et 9,12 min (psilocine)
Cette méthodologie chromatographique rigoureuse garantit que la psilocybine et la psilocine peuvent être utilisées de manière fiable dans des contextes thérapeutiques.
Le développement de protocoles d’extraction simples et relativement peu coûteux permet des déterminations fiables du contenu des substances pour les formulations pharmaceutiques commerciales et cliniques.
Cette méthode représente une avancée significative dans la mesure précise de ces composés, facilitant leur utilisation future pour quantifier précisément les substances et développer des formulations pharmaceutiques fiables pour la recherche clinique et la pratique thérapeutique.
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